本发明公开了一种酿酒酵母gsh1缺失突变株的构建方法及应用,步骤是:A、获得Δgsh1突变株:酿酒酵母基因同源重组敲除原理、引物设计、敲除片段转化方法按照文献所描述的方法进行(Yeast,1998,14:953-962),该方法是目前酿酒酵母中基因敲除的通用方法;依据酿酒酵母gsh1基因序列设计引物:上游引物P1和下游引物P2;利用上游引物P1和下游引物P2对质粒pFA6a-Kan?MX6进行PCR扩增,获得含酿酒酵母gsh1基因上下游序列的敲除片段;通过醋酸
锂/PEG的转化方法将敲除片段导入酿酒酵母BY47421菌株细胞,筛选得到酿酒酵母的Δgsh1突变株YJL101C。利用微生物遗传学方法构建酿酒酵母细胞Δgsh1突变株,再利用突变株进行氯化镉等重金属细胞毒性的检测,以提高细胞毒性检测灵敏度,方法易行,操作简便。
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来源：北方有色网
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