本发明涉及一种大规模提取去除内毒素的质粒的方法，包括先通过经典碱裂解法获得粗分离的质粒DNA，然后依次加入异丙醇、NH4Ac溶液、RNase A、NaCl，再加入PEG6000和NaCl的混合溶液，期间使用TE溶液溶解沉淀，通过无水乙醇重新沉淀，通过70%乙醇洗涤沉淀并配合离心操作，干燥后最终用TE溶液溶解沉淀，获得目的质粒。本发明能很好的去除内毒素对质粒DNA的污染，本发明所使用的所有试剂均为实验室常备的化学试剂，操作方法简洁，易于掌控，适合大规模质粒的提取。本发明所获得的质粒浓度可达5mg/mL，且内毒素低于5EU/μg，质粒可用于酶切、DNA序列的测序、细胞转染、病毒包装以及临床动物免疫实验。
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来源：北方有色网
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