本发明一种用超敏化学发光酶联免疫吸附定量 测定人Her－2/Neu癌基因可溶性产物sp185Her －2的方法。使用奥地利Bender MedSystems GmbH公司的一对抗sp185Her－ 2单克隆抗体，采纳固相双位点夹心式酶联免疫 吸附技术，用抗sp185Her－2单克 隆抗体包埋小容量微孔后，样本中sp185Her－ 2结合在包埋抗体上；加入辣根过氧化酶(HRP) 联结的单克隆抗sp185Her－2抗 体后，它和已被第一抗体捕获的sp185Her－ 2结合；孵育后洗除未结合的抗 sp185Her－2酶联结抗体；加入辣 根过氧化酶超敏化学发光底物后；通过化学发光仪测定425nm 处发光量来定量样本中sp185Her－ 2浓度。本法检测线性范围0－10ng/ml sp185Her－2 (R2＝0.9999)，最低检测限度 40.15pg/ml sp185Her－2。本发明 改进Bender MedSystems ELISA，采用小容量微孔板，在不影 响反应敏感性的前提下，减少了包埋抗体和其他反应试剂的使 用量，加快了反应速度；采用超敏化学发光底物和化学发光仪， 加宽了检测线性范围，使检测限度下移，提高了反应敏感性。 人血清Her－2/Neu癌基因可溶性产物sp185Her －的测定，实时观察乳腺癌患者术后 sp185Her－含量的变化，有助于 预后的临床评估。本发明为进一步研发临床适用的诊断试剂盒 奠定了基础。
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来源：北方有色网
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