本发明公开了一种哺乳动物细胞表达启动子及其制造和使用方法，该方法包括以下步骤：步骤一，通过化学合成的方式合成引物；步骤二，通过PCR反应，获得启动子序列；步骤三，通过限制性酶切位点：BglII?和Kpn1，上述启动子序列插入包含有ori、卡纳抗性基因、sv40、sv40?polyA、多酶切位点序列的质粒骨架中，得到?pHep/L1质粒；步骤四，转染入E.Coli大肠杆菌进行质粒扩增，提取质粒，进行测序；步骤五，将新获得的质粒插入SEAP和IL10目的基因，通过CsCL密度梯度离心法提取纯净质粒。本发明提高现有质粒和AAV病毒的表达效率。
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来源：北方有色网
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