组织金属蛋白酶抑制因子siRNA表达载体的构建及肝硬化治疗应用,本发明属于基因工程技术领域。本发明根据siRNA的设计原理,分别选择TIMP-1和TIMP-2编码区的核苷酸序列,设计相应的siRNA序列,进行BLAST比较,避免与其他基因同源,化学合成单链寡核苷酸,体外经退火形成双链DNA,与真核表达载体pGeneil-1连接,酶切鉴定和序列测定分析表明成功构建了TIMP-1和TIMP-2的siRNA表达载体,该载体经脂质体转染肝星状细胞(HSC),能明显抑制TIMP-1和TIMP-2的表达;上述表达载体,通过肝硬化动物模型验证,能明显地降低肝组织的胶原纤维沉积,可望成为一种新型的抗肝纤维化的基因疗法应用到临床治疗中。
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来源：北方有色网
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