本发明涉及一种有效降低曼地亚红豆杉(Taxus?x?media)细胞合成C-14位氧化紫杉烷(C-14?oxygenated?taxoids)的方法,属于基因工程的技术领域,是通过根癌农杆菌介导的双元载体转化系统将针对红豆杉紫杉烷14β羟基化酶基因(简称14OH)片段构建的RNA干涉载体导入到曼地亚红豆杉(Taxus?x?media)培养细胞中。利用优化的转化方法成功地获得了转基因细胞。PCR-Southern杂交、RT-PCR基因表达分析和化学成分检测结果显示:曼地亚红豆杉细胞转基因试验取得成功,转基因细胞系中14OH基因mRNA表达水平发生显著地下降。本发明显著抑制了曼地亚红豆杉细胞向C-14位氧化紫杉烷的流向,有望使代谢流向包括抗癌药物紫杉醇(taxol)和及其前体巴可亭III(baccatin?III)在内的C-13位氧化紫杉烷(C-13oxygenated?taxoids),从而为提高紫杉醇的生物合成产量提供一条新方法。
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来源：北方有色网
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