本发明涉及一种以MyD88TIR二聚化为靶点的抗炎抑制剂筛选模型及应用,其特征在于:将MyD88TIR分别与一荧光供体和荧光受体蛋白基因GFP/RFP构建融合蛋白质粒,转染哺乳动物细胞,建立双阳性表达的细胞株。可以检测到FRET现象;当培养基中存在MyD88TIR二聚化抑制物时,提示了依赖双阳性表达GFP-MyD88-TIR和RFP-MyD88-TIR的细胞株,经体外结合分析,可以进一步确定抑制物是否直接阻断了TIR的相互作用。结合真核细胞的荧光FRET阻断结果和原核表达的重组蛋白相互作用分析,可确定MyD88TIR二聚化的抑制物。利用该模型可以对商品化的小分子库、自行制备的天然产物组分或各种化学合成物、修饰物进行广泛的筛选,从中获得有效的MyD88二聚化的抑制性化合物,参与对MyD88信号通路依赖的慢性炎症、自身免疫性疾病的药物筛选。
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来源：北方有色网
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