本发明公开的一种4‑巯基尿嘧啶的双功能标记方法及其在序列富集与单碱基分辨测序中的应用，属于核酸化学技术领域。本发明利用了N‑己‑5‑炔基‑2‑碘乙酰胺(E‑IAA)对4‑巯基尿嘧啶进行亲核取代反应从而实现双功能的标记，双功能体现在：末端的炔基可以与带有生物素的叠氮基团在温和的条件下进行高效交联，实现了对含有4‑巯基尿嘧啶的序列富集，近端的N‑H键可以改变4‑巯基尿嘧啶原本的碱基氢键配对模式，在其位置上产生T到C的突变，从而实现对4‑巯基尿嘧啶以及核酸衍生物的单碱基分辨。该双功能的标记反应效率高，且具有良好的生物兼容性。
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来源：北方有色网
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