本发明可二次验证碱基信息的DNA测序方法涉及的是一种能够原位清除延伸标记物,能够二次验证同一个碱基位置的信息,逐个碱基鉴定未知DNA序列。该技术过程如下:1)3′端硫代修饰的测序引物与被固定的待测DNA序列进行杂交;2)加入第一次延伸反应溶液,延伸四种荧光标记的核苷酸单体,通过检测得到碱基信息;3)将2)中延伸上的核苷酸单体用酶进行切割清除;4)加入第二次延伸反应溶液,延伸荧光标记的可脱保护的硫代核苷酸单体,通过检测再次得到碱基信息;5)用化学试剂去除4)中延伸上的硫代核苷酸单体上的可脱保护基团和荧光基团;循环上述2)、3)、4)和5)所进行的过程,直到确定待测DNA中的碱基序列信息。
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来源：北方有色网
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