本发明属于生物医学技术领域。基因的异常甲基化参与肿瘤的发生发展,本发明的目的在于克服甲基化敏感性限制性内切酶法、重亚硫酸盐测序法和甲基化特异性PCR法的缺点,提供一种操作简便、敏感性高的PAPOLB基因甲基化定量检测方法。本发明取胰腺癌组织,提取DNA制备ACTB的标准曲线样品,利用全甲基化模板,制备PAPOLB的标准曲线样品;提取待测组织DNA,并进行化学修饰,针对人PAPOLB基因启动子区CPG岛设计甲基化引物及探针,针对人参照基因ACTB启动子区CPG岛设计BSP引物及探针,采用Taqman-MGB实时定量PCR方法对亚硫酸盐处理后的DNA进行实时定量PCR,计算出PAPOLB基因甲基化程度的定量值。本发明方法快速、准确、灵敏度高。
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来源：北方有色网
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