本发明涉及生物医学领域中病毒检测微阵列
芯片的方法,具体为一种RNA介导的DNA连接及在片延伸标记检测RNA病毒方法。其特点是:以待检测病毒核酸序列为模板设计特异性检测探针,检测探针按两部分进行化学合成。如果“靶”病毒存在,则其检测探针的两部分可通过T4DNA连接酶连接。连接后的检测探针与固定在芯片上的其相应的捕获探针杂交,以连接后的检测探针为模板,以捕获探针为引物,进行在片DNA多聚酶聚合(包括Cy3-dUTP)反应产生荧光信号。如果“靶”病毒不存在,则无荧光信号产生。该方法检测的灵敏性比ELISA高十倍,检测的最小稀释浓度为万分之一(10□4,感染提取液/无感染提取液)。以病毒基因组为信息载体设计特异性检测探针、以基于靶RNA(所检病毒RNA)为模板的检测探针的连接、芯片杂交和在片DNA聚合酶延伸标记反应等实验,建立一种操作方便的病毒检测芯片方法。
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来源：北方有色网
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