本发明公开了一种数字化单分子
电化学检测碱性磷酸酶的方法。单个碱性磷酸酶（ALP）催化其底物对氨基磷酸酚（p?APP）产生还原性的对氨基苯酚（p?AP），p?AP可立即将Ag+还原成Ag0沉积到微电极表面，最后通过金属溶出伏安法得到电信号。本发明利用软光刻技术构建了彼此独立的纳米金微电极阵列，用于数字化分析的高通量平行实验。通过稀释酶浓度和控制反应液体积，保证每个微电极中至多含有单个酶分子，从而实现碱性磷酸酶的单分子检测。通过数字化分析的结合，ALP的检出限从50?aM降到1?aM，有效地提高了方法的灵敏性和可靠性，并成功用于肝癌细胞这一复杂体系中ALP的检测。该方法在探究分子的物理化学性质、单个生物分子检测及单细胞分析中有广泛的应用前景。
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来源：北方有色网
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