含反义碱基的探针法实时荧光PCR，其特征是所选的TaqMan及MGB探针的中部序列引入1～2个或以上的反义修饰的2’-O-Methyl碱基，2’-F-RNA碱基；其关键是荧光TaqMan/MGB探针5’端荧光基团标记的正常碱基序列仍能被Taq酶的外切酶活性水解产生荧光，探针因中部的反义碱基而失去了作为PCR扩增模板作用，引物-探针聚合因不能延伸而不能扩增，结合中部同序引物，单独矿物油密闭，消除指数非特异性反应。
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来源：北方有色网
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