本发明公开了一种绝对定量细胞内DNA双链断裂数量的方法及应用。该方法将带有末端修饰的外源核苷酸片段插入至固定细胞基因组DNA双链断裂处，然后将基因组片段化并连接衔接接头，针对外源核苷酸片段和衔接接头设计特异性PCR引物和特异性荧光探针，结合细胞内参基因，构建数字液滴PCR体系，定量细胞内DNA双链断裂数量。本发明使得检测DNA双链断裂摆脱了序列依赖性，广泛适用于绝对精准定量动植物内因疾病、辐射、药物或者基因编辑等各种原因造成的DNA双链断裂数量，可用作检测射线损伤、化学药物损伤、基因编辑脱靶效率等问题的有效工具，在分子生物学和临床诊断中具有非常广阔的应用前景。
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来源：北方有色网
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