本发明公开了一种疏水蛋白‑荧光蛋白融合蛋白及其构建与应用，其构建为：(1)化学合成改良过的疏水蛋白mHGFI、荧光蛋白smURFP及HO‑1的核苷酸序列；(2)将荧光蛋白基因smURFP的核苷酸序列与HO‑1的核苷酸序列连接；再将疏水蛋白基因mHGFI的核苷酸序列和荧光蛋白基因smURFP与HO‑1基因的核苷酸序列连接得到融合序列；(3)将融合序列连接到大肠杆菌表达载体上，得到重组表达载体；(4)将重组表达载体转入宿主大肠杆菌中，得到重组大肠杆菌；(5)破菌后，通过Ni亲和层析、离子交换层析、凝胶过滤层蛋白纯化方法得到疏水蛋白‑荧光蛋白融合蛋白。本发明对从大肠杆菌中纯化出的融合蛋白进行凝血酶检测，与其他检测方法相比具有生产成本低、生产效率高、操作简便、反应迅速、检测特异性与灵敏度高的优势。
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来源：北方有色网
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