提供了一种将虫荧光素酶与一种化学本体结合 的方法，具体地是与一类特异的结合剂如抗体，抗原或核酸，以 及更具体地说是一种抗体结合的方法，它包括(a)将虫荧光素酶 与一种或多种D-虫荧光素，镁离子和腺苷三磷酸混合以及(b) 用共价偶联剂在虫荧光素酶和结合剂之间进行共价偶联反应， 其中D-虫荧光素，镁离子和/或腺苷三磷酸的量足以保护虫荧 光素酶的活性免受共价偶联剂的抑制。优选步骤(a)的操作是 将虫荧光素酶与其底物在溶液中混合并优选镁和腺苷三磷酸 二者以腺苷三磷酸镁的形式存在(Mg2+ATP)，可选择地与D- 虫荧光素一起使用。本发明第二个方面由本发明的方法提供了 一种包含与活性虫荧光素酶结合的化学本体的标记的化学本 体。优选化学本体是一种适于特异的结合测试应用的结合剂， 优选是抗体、抗原或核酸。当结合剂是核酸时，优选寡核苷酸， 但可以是多核苷酸或单个核苷酸，并且可被用做杂交探针或链 延伸引物，例如PCR引物。最好本体是一种以前曾试图用于与 虫荧光素酶偶联，但结果却是无活性的抗体。另外还提供了检 测试剂盒。
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来源：北方有色网
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