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本发明公开了一种可视化生物传感器件及其制备方法,融合石墨烯量子点多色荧光的优良光电特性及其生物学方面的优点,采用湿化学方法制备出不同尺寸和不同发光颜色的石墨烯量子点样品,充分考虑石墨烯量子点的表面与边缘的化学特性及后续生物分子的组装,选择适当的化学基团对GQD表面及边缘功能化处理,在不同荧光石墨烯量子点分别组装不同生物分子构建生物传感器。生物分子对GQD荧光具有不同的影响,光谱强度、峰值位置等特征参数与生物分子浓度、种类之间存在定量关联,在此基础上直接进行可视化分子探测,可应用于生物医学检测和分析,为疾病诊疗提供更准确的参考;且便于检测多种生物分子。
本发明公开了一种ZnTCPP/TOAB发光电极、制备方法及其在发光成像平台中的应用。该发光电极表面修饰有ZnTCPP与TOAB,其中,ZnTCPP与TOAB的摩尔比为10:0.2~1,该电极的制备过程中首先将印刷电极清洗吹干,然后配制TOAB甲苯溶液,并将ZnTCPP溶于TOAB甲苯溶液中,超声振荡混合,得到ZnTCPP和TOAB的混合溶液,最后将混合溶液滴涂到印刷电极上,即得ZnTCPP/TOAB发光电极。在该电极基础上,引入搭载有CCD照相机的发光成像仪及电化学工作站,可构建发光成像平台,实现生命体代谢产物的检测。该检测平台信号灵敏、肉眼可见、检测下限低,为生命体代谢产物的发光成像和检测提供了新的思路,同时拓展了电化学和电致发光技术的分析应用。
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本发明涉及乳腺肿瘤组织中微量元素的X射线吸收近边结构的检测方法,属于微量元素化学环境检测技术领域。本发明是利用同步辐射装置的XAFS实验站记录正常的、良性的和癌变的乳腺组织中的微量元素CA、FE、CU、ZN等生物组织中的微量元素的K边XAFS谱,并对其近边结构(X-RAY ABSORPTION NEAR-EDGE STRUCTURE,XANES)进行了分析,根据不同组织中微量元素化学环境的差异提供一种乳腺肿瘤组织的诊断方法,检测结果准确性高。由于采用上述诊断方法,本发明所具有的优点和积极效果是:检测结果准确性高,数据处理的精确度好,对乳腺肿瘤诊断和肿瘤发生、发展和预后处理的机制研究具有更加明显的指导意义,可以达到对症治疗的目的。
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本发明公开了一种用于酶解法生产降血糖肽过程的实时监控方法,通过采用旁路的方法检测酶解液的拉曼光谱,然后对拉曼光谱数据的处理,建立二级结构组成比例与酶解蛋白抑制α‑葡萄糖苷酶活性的模型,从而实现对蛋白酶解液的α葡萄糖苷酶抑制率进行实时监控。本发明通过采集降血糖肽的制备过程中的拉曼光谱,对其进行分析计算,能够得到酶解反应产物对α葡萄糖苷酶抵制活性,具有方便、速度快的优点。此外,在检测过程中,无需化学试剂,检测成本低,并且不会对环境造成污染,这些优点是湿化学检测方法无可比拟的。
金刚石薄膜具有极端的物理化学性能、良好的生物相容性和化学稳定性;金纳米粒子具有表面增强拉曼光谱效应。本发明提供一种金纳米粒子修饰金刚石薄膜的表面增强拉曼光谱活性基底及其制备方法,该表面增强拉曼光谱基底由金刚石薄膜和修饰在金刚石薄膜上的金纳米粒子组成,通过紫外光化学反应法将金刚石薄膜表面活化处理,在其表面引入氨基;然后进一步在氨基修饰的金刚石薄膜表面自组装一层均匀分布的金纳米粒子,形成具有稳定性高的金纳米粒子修饰金刚石薄膜的表面增强拉曼光谱基底材料。该表面增强拉曼光谱活性基底具有制备简单、稳定性高和拉曼增强效果好,可应用于物质痕量分析和单分子检测、化学和生物传感,生物医学检测等。
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本发明涉及电化学分析检测领域,且特别涉及一种碳纳米管/金纳米复合材料修饰电极及其制备方法与应用。本发明提供的碳纳米管/金纳米复合材料修饰电极,其由上述的碳纳米管/金纳米复合材料修饰电极的制备方法制备得到。该修饰电极是一种高灵敏的电化学传感器。该修饰电极具有较短的响应时间,较宽的线性范围,较低的检测限,良好的选择性和较高的稳定性等优点。将本发明提供的碳纳米管/金纳米复合材料修饰电极应用在柠檬黄的检测中,检测精确简便。
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本发明公开了一种水体有机污染智能化溯源方法及系统,属于环境分析化学技术领域。包括获取受污染水体自上游至下游的若干水样的高效液相色谱‑串联质谱的有机物分析检测数据;根据所述分析检测数据,对水样中的有机物进行高通量筛查,确认水体中的污染物;根据所确定的污染物,通过网络分析识别污染源;根据所识别的污染源以及所述污染源的受纳水体中的有机污染物,利用机器学习分类模型,确定污染源中的关键污染物,量化其污染贡献。本发明能够在未知污染源的情况下,实现对污染源及其中关键污染物的智能化追溯,为水环境中有机污染的调查和管控提供技术支撑。
本发明属于生物传感器技术领域,具体涉及一种基于线性适配体‑发夹适配体放大双比率电化学适配体传感器线性范围的制备方法及应用;通过AQ与rGO的非共价作用形成AQ‑rGO复合材料;AuNPs将巯基修饰的发夹适配体‑线性适配体固定在传感界面;发夹适配体的一部分包括适配体序列,携带电化学分子亚甲基蓝,线性适配体携带二茂铁电化学信号分子,从而构建新型双比率电化学适配体传感器;与发夹适配体相比,线性适配体与其目标物AFB1的结合作用更容易发生,因此,导致发夹适配体携带MB信号分子发生变化的目标物AFB1浓度可作为AFB1定性分析的浓度点,实现对食品中AFB1的定性分析,检测灵敏度高、稳定性好。
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一种金纳米复合材料的制备方法,涉及一种材料的制备技术领域,本发明制备出具有良好生物相容性的二氧化硅-金纳米复合材料,可将其修饰在电极表面,制成的电化学传感器能够直接应用于家禽屠宰预冷水中血红蛋白的检测,能够直接检测预冷水中血红蛋白的浓度,该电化学传感器检测范围宽,重现性好,结果准确等优点,同时预冷水检测避免了检测样品的处理以及较长的分析时间,具有一定的实际应用价值。
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本发明涉及一种多价苯噻菌酯模拟表位多肽及其应用,尤其是一种与苯噻菌酯单克隆抗体特异性结合的多价模拟表位多肽,以及所述多价多肽在免疫检测中的应用,属于生物技术领域。基于苯噻菌酯噬菌体展示多肽模拟表位的氨基酸序列,以赖氨酸为支架和间隔臂,固相合成获得多价模拟表位多肽;将多价多肽的氮端乙酰化,碳端的赖氨酸侧链提供唯一的游离氨基用于标记。这种多价模拟表位多肽与苯噻菌酯单克隆抗体的亲和力是单价模拟表位多肽的13.6倍,在均相免疫分析方法中可以显著降低检测方法的背景信号,提高检测分析方法的敏感性。该多价模拟表位多肽可作为化学合成半抗原的替代物,建立均相、一步的免疫检测方法,用于快速、灵敏、方便和经济的检测环境和农产品中残留的苯噻菌酯。
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本发明涉及分析化学技术领域,特别涉及一种银杏内酯原料成分定量检测方法及其指纹图谱构建方法。该检测方法包括:取银杏内酯原料供试品进行1H NMR检测,含量测定采用BrukerAV‑500型核磁共振仪,以DMSO‑d6为溶剂,3‑环丁烯砜为内标,采用绝对定量法进行银杏内酯不同单体成分的同时定量。另外以DMSO‑d6为溶剂,建立银杏内酯原料的1H NMR指纹图谱。本研究建立的银杏内酯原料药1H NMR含量测定和指纹图谱分析方法,快速,便捷,准确,且具有良好的精密度、稳定性和重复性,能够准确检测银杏内酯原料的成分含量,获得的指纹图谱能够客观评估样品的质量。
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本发明公开了一种基于便携式可见-近红外光谱检测系统的黄酒发酵过程中总糖含量在线监控的方法。具体检测包括如下步骤:选取黄酒发酵过程的醪液并进行相关预处理后作为样本,用于可见-近红外光谱数据采集和总糖含量的常规理化分析测定;通过光谱预处理和化学计量学法建立总糖含量的预测模型;然后将采集得到的光谱值带入该模型即可得到待测样本的总糖含量。本发明利用便携式可见-近红外光谱检测系统结合化学计量学法实现对黄酒发酵过程中总糖含量的在线监控,仪器携带方便,检测速度快、成本低,满足黄酒发酵过程中不同位置不同时间段的总糖含量快速监控,以科学指导黄酒生产。
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本发明公开了一种基于双极电极阵列的可视化胆碱传感器,属于生物传感器技术领域。本发明基于胆碱氧化酶/碳纳米管/壳聚糖修饰电极、双极电极及微流控芯片技术,利用电化学发光成像来实现胆碱的可视化检测。由于双极电极是一种不需要外部电接触即可在其末端发生电化学反应的导电材料,这种特性使其便于进行大量阵列分析,利于大批量生产,从而降低检测成本。采用的电化学发光成像技术具有灵敏度高、光路简单等优点,用于胆碱的可视化检测,方法简便、结果直观。
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本发明涉及一种特异性识别庆大霉素的ssDNA适配体及其应用,属于生物化学与分子生物学、分析化学和组合化学领域。本发明提供了利用庆大霉素修饰的琼脂糖凝胶亲和层析‑SELEX技术筛选庆大霉素适配体的方法,得到ap5、ap8、ap22、ap26四条与庆大霉素具有高亲和力的ssDNA适配体序列,且最优适配体ap26已被成功用于金胶比色法(AuNPs)检测庆大霉素。本发明为庆大霉素残留的检测提供了亲和力高、特异性高、易修饰和标记的识别元件和多种检测方法。
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特异性识别链霉素的短链DNA适配体序列及其应用,属于生物化学与分子生物学、分析化学和组合化学领域。本发明通过适配体筛选技术获得的四条与链霉素具有高亲和力的单链ssDNA适配体序列Ap1,Ap2,Ap3,Ap4,且利用最优适配体Ap2建立了一种基于两轮核酸外切酶III酶切循环放大和DNAzyme催化显色反应的链霉素可视化高灵敏检测方法。本发明为链霉素残留的检测提供了亲和力高、特异性高、易修饰和标记的识别元件和新型的高灵敏检测方法。
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本发明公开了一种Nanos2启动子核心区域关键转录因子的验证方法:首先,对Nanos2 5’侧翼区序列进行PCR扩增,构建真核表达载体pNanos2‑EGFP,将pNanos2‑EGFP、pEGFP‑N1、pLinker‑EGFP分别转染DF‑1细胞,以对Nanos2启动子区定性分析;分别构建启动子5’端不同长度缺失载体pGL3‑1187、pGL3‑959、pGL3‑788、pGL3‑493、pGL3‑155与pRL‑SV40共转染DF‑1细胞,进行双荧光素酶报告基因检测以对Nanos2启动子核心区域进行鉴定,构建缺失核心区域载体,再次进行双荧光素酶活性分析,观察是否缺失核心区域后启动子活性丧失或显著降低;对Nanos2启动子核心区域进行转录因子结合位点预测,进行双荧光素酶报告分析和CHIP试验确定关键转录因子。通过细胞形态学观察、qRT‑PCR、细胞免疫化学、流式细胞分析等方法检测雄性生殖细胞分化情况。
本发明公开了一种基于光学塔姆态光子自旋霍尔效应的超敏太赫兹液体传感器,可应用于化学分析中的液体探测。此传感器由分析物层、锑化铟层、近零折射率材料层和布拉格反射结构层组成,分析物层为待测液体。入射线偏振光光束(太赫兹波段)照射在传感器结构上,通过测量充入待测液体后的反射光自旋霍尔效应的自旋偏移量,可对充入液体的类型和浓度进行检测。这种基于光学塔姆态光子自旋霍尔效应的太赫兹液体传感器,自旋偏移量的数值大,对待测液体的类型和浓度变化非常敏感,具有较高的强度灵敏度及优异的传感性能。本发明的传感器在对液体进行检测时,对温度等环境因素依赖性不高,具有较好的器件稳定性。
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本发明公开了一类衍生化试剂及其应用。涉及分析检测领域,其具体结构如通式Ⅰ所示;其能与质谱难检测分子的特定基团发生化学反应,生成相应质谱易检测衍生物;从而有效解决了现阶段一些质谱难检测分子存在的灵敏度有限、专属性不高等问题,实现难检测分子的质谱检测分析。
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本发明涉及血清外泌体人膜联蛋白A11(Annexin A11,ANXA11)在诊断胰腺癌(pancreatic cancer,PC)中的应用。本发明公开血清外泌体ANXA11在诊断胰腺癌的产品中的应用;所述产品应用于点免疫印迹实验中检测胰腺癌标记物ANXA11、CA19‑9、CEA、ANXA11+CA19‑9、ANXA11+CEA。本发明还公开了检测试剂盒检测血清中ANXA11的检测方法,包括以下步骤:S1、通过抗原抗体反应检测血清中ANXA11的浓度;S2、采用电化学发光免疫分析法分别测定血清CA19‑9、CEA的水平;S3、统计分析:S4、绘制ROC曲线,评价观察指标的诊断效能。本发明针对PC的早期检出率问题,为PC诊断找到一个新的特异性诊断标志物血清外泌体ANXA11。
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本发明公开了一种干姜的质量控制方法,本发明采用HPLC‑PDA法测定干姜药材中6‑姜酚、8‑姜酚、6‑姜烯酚、10姜酚4种姜酚类化学成分及α‑姜黄烯、(E)‑β‑金合欢烯2种挥发油类化学成分的含量;并以姜酚类成分总量、挥发油类成分总量或者姜酚类和挥发油类成分总量作为评价指标,用于制定评价干姜药材品质及进行质量控制的标准;该方法通过同时对干姜药材两类活性成分进行检测与指纹图谱进行分析,与单一分析某一个或一类化学成分比较,能够全面、客观、有效评价干姜药材的品质,并用于其质量控制,且该方法操作简便,稳定性好,易于推广。
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聚合物自组装超微孔膜免疫组合传感器的制备方法,涉及电化学测试技术领域,将超微孔膜材料聚丙烯腈-共聚-丙烯酸先修饰到玻碳电极表面,再采用盐酸1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺和N-羟基琥珀酰亚胺的混合溶液活化膜微孔内壁上的羧基,将单克隆抗体以共价结合形式固定到膜微孔内,以此制备了一种无标记免疫传感器。通过电化学交流阻抗技术,阻抗相对变化值与抗原浓度对数成正比的关系,建立了一种免疫分析方法。由于使用了功能化的聚合物材料,本发明的检测方法的电化学阻抗信号得到放大,检测抗原灵敏度更高。本方法可用于人血清中h-IgG的无标记检测。
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本发明提供一种超声波雾化高压放电联合臭氧紫外氧化消解装置,包括超声波雾化反应室、高压放电反应室、臭氧发生器以及3个内有紫外灯的石英螺旋管,其间通过蠕动泵、循环气泵、管线相连。该方法摆脱了实验室传统分析方法的缺点,无需消耗化学氧化剂,操作方便,设备简单小巧,工艺流程简化,成本低,实现了在线连续氧化消解,特别适用于环境水质在线连续检测系统中的水处理。
本发明涉及一种基于树枝状高分子双重放大标记小分子竞争探针的制备及应用,属于化学发光体外诊断中的化学发光标记领域。该双增强放大小分子标记方法包括如下步骤:步骤一:树枝状高分子‑链霉亲和素‑化学发光信号物质复合体的制备;步骤二:竞争小分子的生物素化标记;步骤三:双重放大化学发光免疫标记检测探针复合体的制备。本发明中双重放大化学发光免疫检测探针,将增强发光强度和增加磁性微球的探测分子结合量两种方式有效结合,利用生物素亲合素间结合作用实现一次放大,同时利用标记了信号物质的树枝状高分子实现另一次放大,双重放大模式极大的提升了化学发光免疫分析信号强度。
本发明E.coliO157 : H7鞭毛蛋白H7抗原片段的表达、纯化及应用涉及基因工程技术、疫苗和诊断试剂领域。本发明是通过计算机分析,筛选出E.coliO157:H7Flic蛋白内的强抗原表位,第215个氨基酸至第345个氨基酸,共131个氨基酸,选择原核生物偏爱的密码子,化学合成抗原表位的全新基因序列,利用基因工程技术,表达该基因片段、制备E.coliO157:H7Flic蛋白强抗原表位片段。表达的蛋白可用于E.coliO157:H7感染抗体的检测及单抗和多抗的制备。
本发明公开了一种甲基对硫磷人工半抗原、人工抗原的制备方法及其用途。属于农药免疫化学技术领域。发明以3-巯基丙酸作为功能团试剂,从甲基对硫磷的甲氧基部位引入间隔臂和活性基团,合成了半抗原O-甲基-N-(2-羧乙基)硫代-O-(4-硝基苯基)硫代磷酸酯(简称MP)。然后分别通过混合酸酐法和活性酯法与蛋白质偶联制备人工抗原。将免疫原免疫动物制备了对甲基对硫磷高亲和力、高特异性的抗体。用该抗体建立的酶联免疫吸附分析方法(ELISA)可用于快速检测样本中痕量的甲基对硫磷残留。
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本发明属于分析化学及临床医学领域,涉及人类非小细胞肺癌相关的血浆代谢小分子标志物及其应用。非小细胞肺癌相关的血浆代谢小分子标志物,该标志物为皮质醇、皮质酮和4-甲氧基苯乙酸中的一种或多种。所述的血浆代谢小分子标志物,该标志物由皮质醇、皮质酮和4-甲氧基苯乙酸构成。上述三种标志物含量范围(95%置信区间)分别为,皮质醇(0.00018~0.00067)、皮质酮(0.000029~0.00010),4-甲氧基苯乙酸(0.000015~0.000022),代谢物在上述范围内可以提示肿瘤的发生。正常组相应的水平范围为皮质醇(0.0030~0.0037)、皮质酮(0.00044~0.00056),4-甲氧基苯乙酸(7.39E-07~2.09E-06)。血浆代谢小分子是一种新型生物标志物,相比传统蛋白生物标志物其与疾病结局关联更强,不仅稳定、微创、易于检测,且定量精确。
本发明SARS病毒S蛋白与N蛋白的融合蛋白及其制备、应用涉及基因工程技术、疫苗和诊断试剂领域。通过计算机分析SARS病毒S蛋白和N蛋白的氨基酸序列,筛选出含强抗原表位的SARS病毒的S蛋白片段,即第162个氨基酸至第460个氨基酸,共299个氨基酸,和含强抗原表位的SARS病毒的N蛋白片段,即第1个氨基酸至258氨基酸。选择真核和原核生物均偏爱的密码子,化学合成全新的SARS病毒S蛋白片段和N蛋白片段的基因序列,将两个基因片段串联,利用基因工程技术表达S蛋白片段和N蛋白片段的融合蛋白,两蛋白片段之间用甘氨酸和丝氨酸连接,在N蛋白片段的第一个氨基酸蛋氨酸后插入一个甘氨酸,融合蛋白全长560个氨基酸。表达的融合蛋白可用于疫苗及SARS病毒抗体或抗原的检测,及用于免疫制备抗SARS病毒单抗和多抗等。
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